引用本文
贾晓威, 马艳, 曾宪涛, 袁亚娣, 林英梅, 邵军, 张继斌. 白细胞介素-4-590C/T 基因多态性与牙周炎易感性的Meta 分析[J]. 口腔疾病防治, 2017,25(6): 354-359.
JIA Xaowei, MA Yan, ZENG Xiantao, YUAN Yadi, LIN Yingmei, SHAO Jun, ZHANG Jibin. Association between -590C/T polymorphisms of interleukin-4 gene and periodontitis: A meta-analysis[J]. Journal of Prevention and Treatment For Stomatological Diseases, 2017,25(6): 354-359.  
Doi:10.12016/j.issn.2096-1456.2017.06.003
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白细胞介素-4-590C/T 基因多态性与牙周炎易感性的Meta 分析
贾晓威1, 马艳2, 曾宪涛3, 袁亚娣1, 林英梅1, 邵军1, 张继斌4
1. 广州市中西医结合医院口腔科,广东广州（510800）
2. 湖北医药学院附属东风医院口腔科,湖北十堰（442000）
3. 武汉大学中南医院循证医学与转化中心,湖北武汉（430000）
4. 广州市番禺区中心医院口腔科,广东广州（510800)
【通信作者】张继斌,主任医师,学士,Email：Zpb2002@163.com

【作者简介】贾晓威,主治医师,硕士,Email：liza800528@126.com

收稿日期: 2017-01-08
基金项目: 广东省科技计划项目（2013B021800049）; 广州市医药卫生科技项目（20141A010098）
摘要

目的 评价白细胞介素⁃4⁃590C/ T（IL⁃4⁃590C/T） 基因多态性与牙周炎易感性之间的关系。方法 计算机检索PubMed、Embase、ScienceDirect 和Web of Science、CBM、CNKI、WanFang、VIP数据库，搜集国内外有关基因多态性与牙周炎相关性的病例对照研究，经文献筛选、资料提取和质量评价后，采用R 3.3.1软件进行Meta分析，按牙周病分类及人群种族进行亚组分析。结果 Meta 分析结果显示，总体： IL⁃4⁃590C/T等位基因频率及各基因型频率与牙周炎间无显著关联：（T vs C：OR＝1.19，95%CI＝ 0.811.76，P ＝0.37）。亚组：高加索人种对于携带CC基因型而言，携带TT 基因更具牙周炎易感性（TT vs CC：OR＝1.75，95%CI＝1.10～2.78，P ＝0.02），差异具有统计学意义，而该基因型在亚洲人种未见显著差异（P ＝0.63）；在慢性牙周炎与侵袭性牙周炎中，均未发现IL⁃4⁃590C/ T 等位基因频率及基因型频率与二者存在易感性（以 T vs C. 为例，慢性牙周炎：OR＝1.20，95%CI＝0.75～1.90，P＝0.45；侵袭性牙周炎：OR＝1.17，95%CI＝0.77～1.78，P ＝0.45）。结论 IL-4-590C/ T 基因多态性与高加索人牙周炎易感性间有一定相关性，与亚洲人牙周炎易感性无关。

关键词: 牙周炎; 白细胞介素⁃4; 多态性; 基因; Meta 分析
中图分类号:R781.4 文献标志码:A 文章编号:2096-1456（2017）06-0354-06
Association between -590C/T polymorphisms of interleukin-4 gene and periodontitis: A meta-analysis
JIA Xaowei1, MA Yan2, ZENG Xiantao3, YUAN Yadi1, LIN Yingmei1, SHAO Jun1, ZHANG Jibin4
Department of Stomatology Guangzhou Hospital of Integrated Traditional and West Medicine Guangzhou 510800 China
Department of Stomatology Guangzhou Hospital of Integrated Traditional and West Medicine Guangzhou 510800 China
Department of Stomatology Guangzhou Hospital of Integrated Traditional and West Medicine Guangzhou 510800 China
Department of Stomatology Guangzhou Hospital of Integrated Traditional and West Medicine Guangzhou 510800 China
Corresponding author: ZHANG Jibin, Email: Zpb2002@163.com. Tel: 0086-20-34858068
Abstract

Objective To evaluate the relationship between-590C/T polymorphisms of interleukin-4 gene and periodontitis by meta-analysis.Methods Databases including PubMed, EMbase, Web of Science, CBM, CNKI, Wanfang and VIP, were searched from their establishment to December 31, 2016. Only case-control studies on the association between -590C/ T polymorphisms of interleukin-4 gene and periodontitis were selected, and the references of those selected studies were searched by hand. Assessment and data extraction were conducted by 2 reviewers independently, and the meta-analysis was performed with the R 3.3.1 software.Results The meta-analysis showed that there was no association between the IL-4-590C/T polymorphism and periodontitis susceptibility (T vs C: OR=1.19, 95% CI=0.81~1.76, P=0.37). Subgroup analysis showed that the IL-4 -590 TT was associated with periodontitis in Caucasians (TT vs CT: OR=1.75, 95% CI=1.10 ~ 2.78, P= 0.02), but no significant association in Asians ( P=0.63). Meanwhile, IL-4 gene polymorphisms were not significantly associated with the susceptibility of chronic periodontitis (CP) or aggressive periodontitis (AgP) ( e. g. T vs C, CP: P=0.45; AgP: P=0.45).Conclusion Based on current evidence, the polymorphisms of IL-4-590C/T are associated with the increased risk of periodontitis in Caucasians.

Keyword: Periodontitis; Interleukin-4; Polymorphism; Gene; Meta-analysis

牙周炎是牙周支持组织的慢性感染性疾病, 其发生与微生物、宿主和环境等多因素相关[1], 而与基因相关的宿主易感因素是近年来牙周炎病因研究热点[2]。其中, 白细胞介素-4（ interleukin-4, IL-4） 作为参与机体炎症反应的细胞因子, 与牙周炎发生密切相关[3, 4]。目前集中探讨IL-4-590 C/T基因多态性[5]与牙周炎相关性的文献较多, 但由于各研究样本量较小及纳入人群不同等原因, 结论各异。本文利用Meta 分析方法对IL-4-590C/T 多态性与牙周炎易感性的病例-对照研究定量分析, 为IL-4 与牙周炎易感性关系提供循证医学证据。

1 材料和方法
1.1 检索策略

由2名评价员检索建库至2016年12月31日以来的PubMed、Embase、ScienceDirect 和Web of Science、CBM、CNKI、WanFang、VIP数据库, 同时手检纳入文献的参考文献, 如文献报告不详或数据缺乏, 通过信件与作者进行联系索取。

1.2 文献纳入和排除标准

1.2.1 研究类型 IL-4基因多态性与牙周炎的病例-对照研究。

1.2.2 研究对象 临床诊断为牙周炎患者, 包括慢性牙周炎（Chronic periodontitis, CP）、侵袭性牙周炎（Aggressive periodontitis, AgP）。

1.2.3 干预措施 病例组人群为临床诊断为（CP/AgP） 的患者, 对照组为牙周健康人群。

1.2.4 观察指标 IL-4-590C/T等位基因频率及基因型频率, 数据完整或能推算出所需数据。

不完整与作者联系后未回复的文献; 排除家系或亲代研究; 同一机构的两个研究报道了相似的随访区间及相同的目标结果时, 纳入质量更好或信息更全面的报道, 并联系第一作者澄清分歧。

1.3 数据提取

由2 名评价员独立提取资料并交叉核对, 意见不一致时, 通过讨论并征求第三方意见, 最终达成一致。内容包括第一作者姓名、发表时间、研究对象所在的国家及所属种族、研究纳入病种、对照组来源、基因分型方法、各基因型数据、对照组指数（Hardy-Weinberg equilibrium, HWE）等。

1.4 质量评价

2 名评价员独立按照Newcastle-Ottawa scale（NOS）量表对所筛选的文献进行质量评价, 该量表从病例组和对照组研究人群选择、组间可比性、暴露因素测量方面进行评分, 共9分。若有争议请第三者审核并通过讨论达成一致。

1.5 统计分析

Meta分析采用R 3.3.1软件进行。首先通过χ 2检验对纳入的各对照组进行遗传平衡检验。然后对牙周炎IL-4-590C/ T基因多态性采用以下5种遗传模型：①T vs C; ②TT vs CC; ③CT vs CC; ④TT + CT vs CC; ⑤TT vs CC + CT, 采用比值比（OR）及其95%可信区间（CI）及P值作为效应量表示结果, 通过Q 检验和I2检验对同类研究间的异质性进行评价, 若P ≥ 0.1, I2 ≤ 50%, 说明研究间存在异质性可能较小, 采用固定效应模型; 反之, 采用随机效应模型。根据可能出现的异质性进行亚组分析, 考虑按HWE检验结果、人种及病种进一步分类研究。对纳入的文献进行敏感性分析, 评估总体效应估计值是否可靠。采用漏斗图及Egger 线性回归法对所纳文献进行潜在发表偏倚评价, P< 0.05 说明入选文献存在发表偏倚。

2 结 果
2.1 纳入研究的一般情况及基本特征

初检获得272篇文献, 去重后余234篇, 经阅读标题、摘要后剔除不符合纳入标准文献204篇 , 经查找原文及质量评价30 篇后, 进一步剔除重复、交叉及不符合纳入标准的17 篇文献后, 最终纳入13篇合格文献共16项病例-对照研究。累计病例组患者1522例 , 健康对照组2167例。纳入研究人群的人种包括高加索人、亚洲人种、混合人种, 病种包括CP、AgP。纳入文献特征和基因型分布情况见表1。文献检索流程如图1所示。

表1 纳入研究的特征 Table 1 Characteristics of studies included in meta-analysis

图1 文献检索流程图Figure 1 Flow chart from identification of eligible studies to final inclusion

采用NOS评价标准对所筛选的文献进行质量评价, 纳入文献评价9篇为7分, 4篇为6分（表1）, 纳入文献质量整体较高。

2.2 Meta分析

2.2.1 总体分析 IL-4-590C/T基因多态性与牙周炎相关性的Meta 分析结果见表2。所有基因多态性分析均采用随机效应模型, 总体而言, IL-4-590C/T 等位基因频率及各基因型频率均与牙周炎无显著关联（T vs C OR=1.19, 95%CI=0.81~1.76; TT vs CC： OR=1.65, 95%CI=0.69~3.98, P=0.34; CT vs CC：OR=1.26, 95%CI=0.76~2.10, P=0.37; TT + CT vsCC： OR=1.38, 95%CI=0.81~2.36, P=0.24; TT vsCC + CT：OR=1.30, 95%CI=0.73~2.31, P=0.38）。

2.2.2 亚组分析 根据人种进一步亚组分析显示, 高加索人种对于携带CT基因型而言, 携带TT 基因更具牙周炎易感性（TTvs CT： OR=1.75, 95%CI=1.10~2.78）, 差异具有统计学意义（P=0.02）, 而亚洲人种中未见显著差异（图2、表2）。

表2 IL-4 -590 C/ T 基因多态性的Meta分析结果 Table 2 Meta-analysis of association between IL-4 -590 C/T Polymorphisms and Periodontitis

根据病种做亚组分析显示, IL-4-590C/T等位基因频率及各基因型频率与CP、AgP无易感性（以 T vsC 为例：CP：OR=1.20, 95%CI=0.75~1.90; AgP：OR=1.17, 95%CI=0.77~1.78, 表2）。

图2 IL-4-590C/T中 TT vsCC基因模型人种亚组meta分析结果Figure 2 Forest plot for TT vsCC genotype comparison in subgroup analysis by ethnicity

2.3 敏感性分析

对各研究的对照组人群进行HWE遗传平衡检验, 结果见表1。胡晓春[13]、Anovazzi[14]、Atanasovska[15]和Loo等[16]的研究共4篇不符合遗传平衡。分别对这4 篇文献进行敏感性分析, 去除后与原分析结果未见显著改变。另外对符合HWE平衡检验的12篇研究行敏感性分析发现Meta分析结果稳定。

2.4 发表偏倚

应用Egger 法行发表偏倚的评价, 其中基因模型TT vs CC、CT vs CC、TT + CT vs CC基因模型, Egger’ s 检验显示P=0.08、 P=0.88、P=0.93（图3）, 提示纳入文献无显著发表偏倚; TT vs CT、TT vs（CC + CT）基因模型, Egger’ s 检验P=0.01、P=0.02, 提示潜在发表偏倚仍存在。

图3 IL-4 基因-590C/T 多态性与牙周炎易感性漏斗图（TT + CT） vs CCFigure 3 Egger’ s funnel plot of IL -4 -590C/T polymorphysims and periodontitis （TT + CT） vsCC

3 讨 论

目前, 大约有 10％世界成人患有严重的牙周病损, 在我国患病率更高于龋病, 是成人牙齿缺失的主要原因。有学者分析发现牙周病患者的血清中IL-4 的水平增高[9], 在牙周炎炎症活跃区的龈沟液中, IL-4 依赖型的IgG4 浓度是血清中的24 倍, 并且明显高于健康牙周组织的龈沟液中IgG4 的浓度[20]。还有研究发现, IL-4通过促进T辅助细胞2扩增, 抑制T辅助细胞1 增殖, 下调抑制T辅助细胞1介导的免疫应答[3], 参与了牙周炎的病理进程。IL-4 通过与靶细胞膜表面高亲和力的特异性白细胞介素4 受体（ IL-4R）结合, 将信号传导入细胞核内, 发挥生物学效应, 编码IL-4的基因错义突变可导致表达的氨基酸结构改变, 从而使生物学活性发生改变, 进而影响到牙周炎的进程[4]。目前, 有关IL-4 基因多态性与牙周炎关系的研究有IL-4启动子区-590 C/T、-34C/T、-1099T/G的单核苷酸多态性[5, 21], 内含子中一个70 bp 的重复序列多态性等[22] , 其中集中探讨IL-4 -590 C/T基因多态性与牙周炎相关性的文献较多, 且在高加索人群及亚洲人群中均有研究, 但由于各研究样本量较小及纳入人群不同等原因, 结论各异。Meta 分析能够将研究目的相同的多个研究结果进行定量合并分析和综合评价, 以提高统计检验效能, 解决研究结果不一致的问题, 使研究结论更可靠[23]。

本文采用Meta 分析方法, 按照人群及疾病类型分亚组, 综合评价亚洲及高加索人IL-4-590C/T位点基因多态性与牙周炎易感性间的相关性。研究发现, 高加索人群中 携带IL-4-590TT 基因表型的人群更具牙周炎易感性, 而以中国汉族为主的亚洲人群则与牙周炎易感性无关; 同时在IL-4-590C/基因多态性在慢性牙周炎及侵袭性牙周炎分组中亦无相关性。以上结果可能与以下因素有关：研究人群对照组人群的异质性、病例组与对照组的匹配方式如吸烟情况差异以及基因型分型方法等。

本研究是对当前IL-4 590C/T基因多态性与牙周炎易感性关系的有用总结, 证实了IL-4-590C/T基因多态性在不同种族、地域的人群中分布特点的不一致性, 为牙周炎与细胞因子IL-4之间的关系提供了临床诊断证据。本研究结果与姜晓佳等[24] 、Yan等[25]人的研究结果部分相似, 相比具有如下优点：①姜晓佳等的研究：文献检索日期, 截止2011年9月, 且只评估了IL-4-590位点与慢性牙周炎之间的易感相关性, 纳入文献8篇, 本研究除对文献进行更新外, 又增加了对IL-4-590位点与侵袭性牙周炎之间的易感性分析, 纳入文献14篇, 样本量更大, 研究更全面; ② Yan等人的研究, 文献检索日期, 截止2014年4月, 且研究人群主要集中于高加索人群, 对中国汉族人群仅纳入1篇研究, 本研究增加到4篇, 扩大了研究人群及样本量, 结果更可靠, 对研究我国汉族人群中IL-4-590位点基因多态性与牙周炎的关系更具有临床指导意义。

本研究尚存在以下不足有待完善：①虽然采用了广泛的检索策略, 但诸如增刊、会议论文及部分灰色文献无法获取, 不能排除潜在的发表偏倚; ②纳入研究的总体异质性稍大, 虽然采用了随机效应模型及亚组分析进行处理, 异质性得以降低（高加索人群中T vs C、TT vs CT、TT vs CC + CT 基因模型, I2 < 50%; AgP：I2 < 50%; 符合 HWE遗传平衡人群, I2 < 50%）, 但在其他组基因型中异质性仍存在。此外, 考虑到牙周炎受到吸烟、性别、压力、缺牙数等混杂因素影响, 可能存在很多临床和环境异质性, 影响研究结果。

综上所述, 本研究结果显示, IL-4-590C/T基因多态性与牙周炎无明显相关性, 但可以增加高加索人种患牙周炎的风险, 而在以中国汉族人为主的亚洲人群, 该基因位点多态性与牙周炎易感性无关。为牙周炎易感人群早期诊断及治疗提供科学依据。但受纳入文献数量和质量的影响, 上述结论还需开展更多高质量研究予以验证。

The authors have declared that no competing interests exist.

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